Rh faktorius teigiamas. Kraujo grupės. Rh faktorius
Rh faktoriui nustatyti naudojami du metodai:
a) Rh faktoriaus nustatymas naudojant universalų reagentą;
b) Rh faktoriaus nustatymas anti-D supertsoliklonu.
Rh faktoriaus nustatymas universaliu reagentu
Įranga: specialiai paruoštas universalus reagentas antirezus (D), standartiniai Rh teigiami ir Rh neigiami eritrocitai kontrolei, mėgintuvėliai, Pasteur pipetės, izotoninis natrio chlorido tirpalas.
Rh faktoriui nustatyti galima naudoti šviežią kraujo krešėjimą, paimtą iš piršto prieš pat tyrimą arba konservuotą be jokio išankstinio apdorojimo, taip pat eritrocitus iš mėgintuvėlio susidarius krešuliui ir nusistovėjus serumui.
Nustatymo technika: į mėgintuvėlio dugną įlašinkite 1 lašą standartinio antireuso reagento ir 1 lašą tiriamojo kraujo (arba eritrocitų). Sumaišykite mėgintuvėlio turinį purtydami ir lėtai pasukite, pakreipdami mėgintuvėlį beveik iki horizontalės, kad turinys pasiskirstytų jo sienelėmis. Toks kraujo tepimas ant mėgintuvėlio sienelių išryškina reakciją. Paprastai agliutinacija įvyksta per pirmąją minutę, bet dėl stabilaus antigeno + antikūno komplekso susidarymo ir aiškiai išreikštos agliutinacijos, taip pat dėl lėtos reakcijos galimybės su lengvu eritrocitų agliutinumu, eritrocitų kontaktu su reagentu. sukant vamzdelį reikia bent tris minutes. Tada, siekiant išvengti nespecifinės eritrocitų agregacijos, į mėgintuvėlį įpilama 5-8 ml izotoninio natrio chlorido tirpalo ir maišoma nekratant, 2-3 kartus apverčiant mėgintuvėlį. Vertinimas atliekamas vizualiai.
Kartu su pacientų ar donorų kraujo tyrimu atliekamas kontrolinis tos pačios grupės Rh teigiamų eritrocitų ir standartinių Rh neigiamų eritrocitų, būtinai tos pačios grupės su tiriamu krauju, tyrimas.
Rezultatų įvertinimas: agliutinacija didelių eritrocitų dribsnių pavidalu skaidraus skysčio fone rodo Rh teigiamą tiriamojo kraujo priklausomybę (Rh +).
Agliutinacijos nebuvimas (vienalytės spalvos skystis mėgintuvėlyje) rodo Rh neigiamą tiriamojo kraujo priklausomybę (Rh-).
Į rezultatą atsižvelgiama kaip į teisingą patikrinus kontrolinius mėginius, ty esant teigiamam rezultatui su standartiniais Rh teigiamais eritrocitais ir nesant agliutinacijos su standartiniais Rh neigiamais eritrocitais, tos pačios grupės su tiriamu krauju pagal ABO sistema.
Rh faktoriaus nustatymas naudojant Zoliclon anti-D SUPER
Aktyvus coliclon anti-D SUPER principas yra monokloninis žmogaus anti-D antikūnas, gaunamas heterohibridiniu būdu susiliejus žmogaus limfoblastoidų linijai ir pelės mielomos ląstelių linijai. Reagentas neturi patogeninių virusų (hepatito, AIDS). Anti-D SUPER yra specifinis Rh faktoriui, todėl gali būti naudojamas D-antigenui aptikti bet kurios kraujo grupės eritrocituose. Anti-D SUPER yra skysto pavidalo 5 arba 10 ml buteliukuose (1 ml yra 10 dozių). Kaip konservantas naudojamas 0,1 % natrio azido tirpalas. Tinkamumo laikas 1 metai, esant +2 0 C - +8 0 C temperatūrai. Atidarytą buteliuką uždarius galima laikyti šaldytuve mėnesį.
D-antigenas nustatomas kraujuje, paimtame iš piršto arba iš venos.
A) Apibrėžimas plokštumoje.
Ant plokštelės užlašinama apie 0,1 ml reagento, šalia – nedidelis lašelis tiriamojo kraujo (0,01 ml) ir lašai sumaišomi. Agliutinacijos reakcija pradeda pasireikšti po 60 sekundžių. Rezultatas nuskaitomas po 3 minučių. Jei įvyksta agliutinacijos reakcija, kraujas yra Rh teigiamas, jei ne, jis yra Rh neigiamas.
B) Nustatymas mėgintuvėlyje. Į mėgintuvėlį įlašinami 2 lašai reagento ir 1 lašas tirtų eritrocitų 5 % suspensijos izotoniniame natrio chlorido tirpale. Mėgintuvėlio turinys kruopščiai sumaišomas purtant ir inkubuojamas 30-45 minutes kambario temperatūroje. Mėgintuvėlis centrifuguojamas 1500-2000 aps./min 1 minutę, po to, purtant mėgintuvėlį, nustatoma agliutinacija – makro ir mikroskopiškai.
Greitasis metodas standartiniam universaliam reagentui nustatyti mėgintuvėlyje nekaitinant
Tyrimui galite naudoti šviežią kraujo krešėjimą, paimtą iš piršto (ar venos) prieš pat tyrimą, arba konservuotą kraują be išankstinio apdorojimo, taip pat eritrocitus iš mėgintuvėlio po krešulio susidarymo ir serumo nusėdimo.
Reakcijos procedūra. Tyrimas atliekamas centrifuginiuose mėgintuvėliuose, kurių tūris ne mažesnis kaip 10 ml. Į mėgintuvėlio dugną įlašinamas vienas lašas standartinio universalaus reagento, kuris yra AB (IV) grupės antireuso serumas, praskiestas 33 % dekstrano tirpalu. Tada į jį įlašinamas vienas lašas tiriamo kraujo (arba eritrocitų). Mėgintuvėlis sukasi apskritimu, ant jo užtepamas turinys. vidinis paviršius kad turinys pasklistų palei sienas. Tai žymiai pagreitina agliutinaciją ir daro jį dideliu žiedlapiu. Agliutinacija ant mėgintuvėlio sienelių, kaip taisyklė, įvyksta per pirmąją minutę, tačiau norint susidaryti stabilus antigeno-antikūno kompleksas ir aiški agliutinacija, reikia stebėti mažiausiai 3 minutes. Tada, kad būtų išvengta nespecifinės eritrocitų agregacijos, į mėgintuvėlį įpilama 2-3 ml fiziologinio tirpalo ir maišoma apverčiant mėgintuvėlį vieną ar du kartus (nekratant!).
Rezultatų interpretacija. Agliutinacijos buvimas (dideli dribsniai skaidraus skysčio fone) rodo tiriamo kraujo Rh teigiamą priklausomybę. Agliutinacijos nebuvimas (vienalytės spalvos rožinis skystis mėgintuvėlyje) rodo tiriamo kraujo Rh neigiamą priklausomybę.
Laboratoriniai Rh faktoriaus nustatymo metodai
Laboratoriškai paciento kraujo priklausomybei Rh nustatyti naudojami keturi pagrindiniai metodai.
Druskos agliutinacijos metodas
Naudojami specialūs serumai, kuriuose yra visi anti-rezus antikūnai. 2% suspensijos izotoniniame natrio chlorido tirpale formos eritrocitai sujungiami mėgintuvėliuose su antireuso serumu. Mėgintuvėliai 1 valandai dedami į 37 °C temperatūros termostatą, po to vamzdelio dugne esančios eritrocitų nuosėdos tiriamos padidinamuoju stiklu ir į rezultatą atsižvelgiama pagal jo formą. Esant teigiamam rezultatui (Rh+), nuosėdos turi būdingą gijų arba grūdėtumo raštą. Su neigiamu (Rh-) nuosėdos dedamos į vienodą sluoksnį ir atrodo kaip teisingai nubrėžtas apskritimas.
Agliutinacijos metodas esant želatinai
Į du mėgintuvėlius dedama 0,02-0,03 ml tirtų eritrocitų nuosėdų. Tada į pirmąjį mėgintuvėlį įlašinami 2 lašai (0,1 ml) 10% želatinos tirpalo ir 2 lašai (0,1 ml) antireuso serumo, o į antrąjį (kontrolinė) - 2 lašai (0,1 ml) 10% želatinos tirpalo. tūbelę ir 2 lašus (0,1 ml) fiziologinio tirpalo.
Turinys švelniai sumaišomas. Tada vamzdeliai 30 minučių inkubuojami termostate 45-48 °C temperatūroje, po to įpilama 5-8 ml fiziologinio tirpalo ir mėgintuvėliai 1-2 kartus apverčiami maišymui.
Į rezultatą atsižvelgiama apžiūrint vamzdelius šviesoje plika akimi arba per padidinamąjį stiklą. Jei eritrocitai yra Rh teigiami, jie agliutinuojasi. Agliutinacijos nebuvimas rodo, kad tirtas kraujas yra Rh neigiamas. Kontroliniame mėgintuvėlyje neturėtų būti eritrocitų agliutinacijos.
Netiesioginis antiglobulino testas (Kumbso reakcija)
Ši reakcija yra jautriausia nustatant nepilnus antikūnus prieš eritrocitų auto- ir izoantigenus. Paprastai jis naudojamas, kai kyla sunkumų nustatant kraujo Rh priklausomybę, susijusią su neaiškiais rezultatais, gautais kitais tyrimo metodais. Reakcija pagrįsta antiglobulino serumo naudojimu.
Kai Rh teigiami eritrocitai gydomi nepilnais anti-Rh antikūnais, jie yra apgaubiami, jautrinami antiglobulino serumui, kuris agliutinuoja įjautrintus eritrocitus, nes turi antikūnų prieš globulinus.
Į mėgintuvėlį įpilamas antirezus serumas ir fiziologiniu tirpalu išplauti eritrocitai, 1 valandai dedami į termostatą 37 °C temperatūroje, po to eritrocitai kruopščiai nuplaunami. Tolesnis reakcijos etapas atliekamas plokštumoje. Lašas eritrocitų suspensijos sumaišomas su tokiu pat kiekiu antiglobulino serumo ir atsižvelgiama į rezultatą. Agliutinacijos buvimas rodo, kad tiriamas kraujo mėginys yra Rh teigiamas. Jei agliutinacijos nėra, tai tirtas kraujas yra Rh neigiamas.
Reakcija su anti-D-monokloniniais antikūnais
Ant tabletės sumaišomas didelis lašas (0,1 ml) anti-D monokloninių antikūnų ir mažas lašas (0,01 ml) tiriamo kraujo.
Reakcija stebima 3 min. Sumaišius anti-D-MKA su Rh teigiamų eritrocitų mėginiais, pastebima sparčiai progresuojanti žiedlapių agliutinacija. Jei kraujas Rh neigiamas, agliutinacijos nėra.
48. Suderinamumo testas pagal Rh faktorių.
Įranga: donoro kraujas, recipiento serumas, 33 % poligliucino tirpalas, centrifugos mėgintuvėlis, natrio chlorido tirpalas, pipetės.
Seka:
a) Paimkite 3-5 ml kraujo iš recipiento venos, centrifuguokite.
b) Į centrifugos mėgintuvėlio dugną skirtingomis pipetėmis įlašinkite 2 lašus paciento serumo, 1 lašą donoro kraujo ir 1 lašą 33 % poligliucino tirpalo.
c) Sumaišykite turinį pakreipdami mėgintuvėlį beveik į horizontalią padėtį ir lėtai sukite aplink ašį, lygiu sluoksniu paskirstydami turinį ant sienelių.
d) Tęskite procedūrą 5 minutes.
e) Po 5 minučių įpilkite 3-4 ml fiziologinio natrio chlorido tirpalo.
f) Sumaišykite turinį 2–3 kartus pakreipdami tūbelę į horizontalią plokštumą (nekratykite!).
Rezultatų interpretacija:
Agliutinacijos nebuvimas, vienodas mėgintuvėlio turinio dažymas rodo donoro ir recipiento kraujo Rh suderinamumą; agliutinacijos buvimas - apie donoro ir recipiento kraujo nesuderinamumą pagal Rh faktorių
Po pirmojo bandymo būtina atlikti Rh faktoriaus suderinamumo testą. Tam yra 2 prieinamus metodus- reakcija išrūgų terpėje ir želatinoje.
Pirmasis būdas: 1-2 lašai paciento serumo ir nedidelis lašelis donoro kraujo užlašinami ant Petri lėkštelės, po to 10 minučių įdedami į vandens vonią (+46~+48 °C). Agliutinacijos buvimas rodo nesuderinamumą.
Antrasis būdas: į mėgintuvėlio dugną įlašinamas nedidelis donoro kraujo lašas, įlašinami 2 lašai pašildyto 10% želatinos tirpalo ir 2 lašai paciento kraujo serumo. Po 10 minučių inkubacijos vandens vonioje val temperatūra +46-+48 °C į mėgintuvėlį įpilkite 5 ml pašildyto izotoninio natrio chlorido tirpalo. „Agliutinacijos buvimas rodo donoro ir recipiento kraujo nesuderinamumą.
Pažymėtina, kad izoimuniniai antikūnai ir kitų sistemų antikūnai aptinkami tais pačiais metodais kaip ir anti-Rh antikūnai, o kai kurie – kaip ABO sistemos antikūnai. Todėl atliekant šiuos suderinamumo tyrimus galima nustatyti donoro kraujo nesuderinamumą su šiais antikūnais.
Instrukcija
Norėdami apibrėžti grupę kraujo ir Rh faktorius ir atlikti specialią analizę kraujo. Norėdami tai padaryti, kreipkitės į privatų, valstybinį ar komercinį medicinos centrą. Prieš apsilankymą neturėtumėte valgyti tris ar keturias valandas. Jūsų kraujas bus paimtas iš venos.
Apmokėkite už analizę gydymo įstaigos kasoje. Jo kaina priklauso nuo miesto, kuriame esate, ir konkrečios gydymo įstaigos. Maskvoje toks tyrimas kainuoja vidutiniškai 500-600 rublių. Rezultatus gausite per dvi ar tris dienas. Jei pageidaujate, už papildomus pinigus galite užsisakyti greitąją analizę. Jei dėl sužalojimo esate paguldytas į ligoninę ir jums reikia perpylimo kraujo, tyrimas apie grupė ir Rh faktorius bus atliktas jums nemokamai kaip privalomojo sveikatos draudimo dalis.
Jei norite, pase uždėkite antspaudą su grupe ir rezusu. Tai galima padaryti viduje gydymo įstaiga. Ši informacija jums padės, jei kada nors būsite nuvežtas į ligoninę be sąmonės ir jums reikės perpilti kraują.
Jei kūdikis dar negimė, galite sužinoti patys grupė jo kraujo. Tam reikia žinoti grupė ir jo tėvų Rezusas. Grupė kraujožmogus priklauso nuo genų, žymimų A, B ir 0. Pirmą grupę turintis asmuo kraujo bus geno 0 nešiotojas, o jo grupė žymima 00. Antrosios grupės savininkas gali turėti A0 arba AA genų rinkinį, trečios – B0 arba BB, o ketvirtosios – AB. Kadangi genas 0 yra recesyvinis, jį slopina kiti, dominuojantys genai A ir B. Pagal šią sistemą pirmos grupės (00) mama, o antrosios grupės tėtis gali susilaukti vaiko su pirmąja arba antra grupe, t. priklausomai nuo genų rinkinio tėve ( A0 arba AA). Jie negali susilaukti sūnaus ar dukters su trečia ar ketvirta grupe, nes nėra geno B. Tuo pačiu metu 00 genų rinkinį turintis vaikas negali gimti motinai, turinčiai ketvirtą grupę su jokiu partneriu.
Kiekvienas žmogus privalo žinoti savo kraujo grupę, įsivaizduokite, jei dėl kokių nors priežasčių jums reikia skubiai jį perpilti? Gelbėtojams ir kariškiams kraujo grupė nurodoma specialioje formos vietoje. Ar žinai savo kraujo grupę?
Mažai kas žino, kad yra duomenų apie daugiau nei šimtą skirtingų kraujo tipų, tačiau pagrindiniai 4 vis dar laikomi pagrindiniais.
Taigi. Antigenai randami eritrocituose, o antikūnai – kraujo serume. Raudonieji kraujo kūneliai gali turėti antigenų A arba B, bet jų gali ir nebūti, vadinasi, O. Taigi galima išskirti 3 vieno geno variantus. Laboratorijoje genų buvimas nustatomas reaguojant su kontroliniais kraujo serumais.
I grupės (O) alfa ir beta agliutinų kiekis plazmoje
II (A) grupė Plazmos agliutinas beta
IV(AB) nėra agliutinų
Grupės nurodomos nurodant rezu - veiksnį, kurio teigiamas rezultatas yra 85% žmonių.
Kaip nustatyti ateities kraujo grupę
RH FAKTORIUS NUSTATYMAS
Kas yra Rh faktorius?
85% žmonių kraujyje yra dar vienas agliutinogenas - Rh faktorius (Rh), o 15% jo nėra. Remiantis tuo, visų žmonių kraujas skirstomas į Rh teigiamą (Rh+) ir Rh neigiamą (Rh-). Rh charakteristika yra paveldima ir išlieka visą gyvenimą. Perpylus kraują, būtina tiksliai nustatyti recipiento ir donoro Rh priklausomybę.
Kaip kongliutinacijos metodu nustatomas Rh faktorius?
Kraujo priklausomybę Rh taip pat atlieka slaugytoja, prižiūrima gydytojui.
Yra keli Rh faktoriaus nustatymo metodai. Labiausiai paplitęs sujungimo Petri lėkštelėse metodas. Šiam tyrimui, be akių pipečių ir izotoninio natrio chlorido tirpalo buteliuko, būtina turėti Petri lėkštelių, vandens vonią su pastovia 46-48 C temperatūra ir standartinius visų ABO grupių antireus serumus. sistema. Analizei imamas dviejų serijų antirezus serumas, vienos grupės pagal ABO sistemą su tiriamais eritrocitais. Ant Petri lėkštelės užlašinami 2 lašai antireuso serumo, kairėje - viena serija, dešinėje - kita 3 eilėmis 3 tyrimams. Į kiekvieną seriją pridedamas lašelis eritrocitų (tyrusių, kontrolinių Rh teigiamų ir kontrolinių Rh neigiamų). Išmaišius, Petri lėkštelė dedama į vandens vonią 10 minučių, po to apžiūrima praleidžiama šviesa.
Agliutinacijos buvimas rodo teigiamą rezultatą, jo nebuvimas rodo neigiamą rezultatą. Šiuo metodu kontrolei naudojami Rh neigiami ir Rh teigiami eritrocitai.
Kaip greituoju metodu nustatomas Rh faktorius?
Pastaruoju metu Rh priklausomybei nustatyti buvo naudojamas greitasis metodas. Reakcija vykdoma mėgintuvėliuose nekaitinant. Tam reikia specialaus serumo, universalaus visoms ABO sistemos kraujo grupėms, specialiai paruošto ant liglkžino.
Į mėgintuvėlį įlašinamas 1 lašas serumo, įlašinamas 1 lašas tirtų eritrocitų ir po 3 minučių sukratymo užpilama 3-5 ml izotoninio natrio chlorido tirpalo, mėgintuvėlis tris kartus apverčiamas ir gaunamas rezultatas. nustatomas atspindintoje šviesoje. Agliutinacijos buvimas rodo Rh antigeno buvimą.
Kaip želatinos ekspresijos metodu nustatomas Rh faktorius?
Taip pat plačiai naudojamas želatinos ekspreso metodas, pagrįstas 1 lašo 10% želatinos tirpalo įlašinimu į kraują ir 10 minučių mėgintuvėlių inkubavimu +37 °C temperatūroje bei šilto izotoninio natrio chlorido tirpalo pridėjimu; sumaišykite tūbelės turinį. Želatina prisideda prie nespecifinės agliutinacijos išnykimo.
Rh nustatymo su papainu metodas pagrįstas tuo pačiu principu.
Bet kuris iš šių metodų gali būti naudojamas kritiniu atveju. Nepriklausomai nuo tyrimų rezultatų ir turimų duomenų apie donoro ir recipiento kraujo grupių tapatybę, prieš perpilant kraują būtina atlikti individualaus suderinamumo tyrimus.
Pagrindinės kraujo grupės
Mokslas nustatė, kad egzistuoja 2 kokybiškai skirtingi agliutinogenai A ir B. Jų yra įvairiose organizmo ląstelėse, tarp jų ir eritrocituose. Tačiau yra ir antikūnų – hemagliutininai A ir B, kurių yra kraujo serume ir kituose žmogaus organizmo skysčiuose. Kai susitinka ir sąveikauja to paties pavadinimo agliutinogenai ir agliutininai (A ir B), eritrocitai sulips. Žmogaus kraujo serume negali būti to paties pavadinimo agliutininų ir eritrocitų agliutinogenų. Tokiu atveju agliutinacija įvyktų paties žmogaus kraujagyslių sistemoje.
Vieno ar kito agliutinogeno buvimas ar nebuvimas lemia žmogaus kraujo grupę. Galimi 4 pagrindiniai deriniai:
Abiejų agliutinogenų nebuvimas ir abiejų agliutininų buvimas, serologinė formulė Olb;
Agliutinogeno A ir agliutinino B buvimas - Av;
Agliutinogeno B ir agliutinino l - B2 buvimas;
Abiejų agliutinogenų buvimas ir agliutininų nebuvimas - 4 grupė pagal Jansky - ABo. Kraujo grupės paprastai nustatomos agliutinogenu.
Taigi: O(I), A(II), B(III), AB(IV) gr. Tačiau iki šiol buvo rasti dar 2 pogrupiai, susiję su agliutinogenu A1 ir A2, esantys (II) ir (IV) pogrupiuose. Dabar vietoj 4 grupių galima vadinti 6 grupes: U, A1, A2, B, A1B, A2B. Kraujo grupė yra pastovi ir nekinta visą gyvenimą.
Hemagliutinacija stebima, jei mišriame kraujyje susitinka to paties pavadinimo agliutininai ir agliutinogenai.
Žmonės, turintys AB(IV) kraujo grupę, yra universalūs gavėjai ty jie gali priimti bet kokio tipo kraują. Savo kraują galima perpilti tik AB (IV) grupės žmonėms. A (II) grupės kraujas gali būti perpiltas asmenims A (II) gr. ir AB(IV) gr. Žmonės su A(II) gr. galite pilti to paties pavadinimo grupę ir O (I) gr. kraujo. Kraujo B(III) gr. galima perpilti asmenims B (III) gr. ir AB(IV) gr. Ir turintis B (III) gr. galima pilti į B (III) gr. ir O(I) gr. Pacientai, sergantys O(I) gr. kraują galima perpilti tik žmonių su O (I) gr. kraujo.
Suderinamumas su kraujo grupėmis
Dėl didelio donoro kraujo, suleisto į pacientą, praskiedimo laipsnio, suleista plazma neturi jokios įtakos recipiento eritrocitams. Tik donorų eritrocitus gali agliutinuoti recipiento serumas, o ne atvirkščiai – tokia yra Ottenbergo taisyklė. Tačiau su dideliu kraujo perpylimu iš universalus donoras O (I) smarkiai nukraujuojančiam pacientui ir net tuo atveju aukštas titras perpiltų kraujo agliutininų (1:200 ir daugiau), ši paciento ir gydytojo taisyklė gali nepavykti. Perpilta plazma nebus pakankamai praskiesta paciento plazmos ir gali sukelti eritrocitų hemolizę, ty įvyks atvirkštinė agliutinacija ir atvirkštinė hemolizė, o ne suleisti eritrocitai, o recipiento eritrocitai sukels hemolizinį šoką. .
Standartiniai serumai nustato specifinį agliutinogeną, o standartiniai eritrocitai – agliutininą. Taigi, kraujo grupę galima nustatyti naudojant standartinius serumus ir standartinius eritrocitus.
Paprastai naudokite standartinius serumus O(I), A(II), B(III), AB(IV).
Serumo tinkamumo požymiai:
Jis turi būti specifinis, tai yra, jame turi būti griežtai apibrėžtų agliutininų – l, B;
Serumas turi būti aktyvus, jo titras turi būti 1:32 A1 ir B eritrocitams ir ne mažesnis kaip 1:16 A2 eritrocitams;
Serumas turi būti lengvas ir skaidrus;
Išrūgos neturi turėti puvimo požymių;
Serumas turi turėti sertifikatą: grupė, titras, galiojimo laikas, serija, paruošimo vieta.
Kraujo grupių nustatymo metodas
Patalpa, kurioje nustatoma kraujo grupė, turi būti šviesi, 15–25 °C temperatūra.
Ant lėkštelės ar stiklelio su pipetėmis (skirtingai!) užlašinamas 1 didelis lašas O (I), A (II), B (III) serumo. Pastebėjus laiką, švaria stikline lazdele arba švariu stiklelio kampu serumo lašai sujungiami su kraujo lašeliais. Nustatymas trunka 5 minutes, suplakant plokštelę, tada į kiekvieną lašų mišinį įlašinamas 1 lašas druskos tirpalo ir įvertinami rezultatai. Geriau, jei serumas yra 2 skirtingų serijų. Abiejų serumų serijų kraujo grupių rezultatai turi sutapti.
Izohemagliutinacijos rezultatų įvertinimas:
Izohemagliutinacija. Esant teigiamai reakcijai, mišinyje atsiranda mažų raudonų prilipusių raudonųjų kraujo kūnelių grūdelių. Grūdai susilieja į stambesnius grūdus, o pastarieji – į dribsnius. Serumas beveik pakitusi spalva;
Esant neigiamai reakcijai, mišinys išlieka vienodos spalvos per 5 minutes. rausva spalva ir grūdų nerasta;
Dirbant su 3 O(I), A(II), B(III) grupių serumais, galimi 4 reakcijų deriniai:
Jei visi 3 serumai davė neigiamą reakciją, tai yra, mišinys yra tolygiai rožinės spalvos - tai yra O (I) kraujo grupė;
Jei tik A (II) grupės serumas davė neigiamą reakciją, o serumas O (I) ir B (III) davė teigiamą reakciją, tai yra, atsirado grūdai - tai yra A (II) kraujo grupė;
B(II) grupės serumas davė neigiamą reakciją, o O(I) ir A(II) grupių serumas davė teigiamą reakciją – tai B(III) kraujo grupė.
Teigiamas reakcijas davė visi 3 serumai – tirtas AB (IV) grupės kraujas. Šiuo atveju tyrimas atliekamas su AB (IV) grupės serumu.
Pastaba! Tirto kraujo lašai turi būti 5-10 kartų mažesni už serumo lašus.
Izohemagliutinacijos klaidos.
Neagliutinuoja ten, kur turėtų būti, ir agliutinuoja ten, kur neturėtų būti. Tai gali būti dėl žemo serumo titro ir prastos eritrocitų agliutinacijos.
Agliutinacijos buvimas ten, kur jos neturėtų būti, yra pseudoagliutinacija, kai raudonųjų kraujo kūnelių kekės sudaro „monetų stulpelius“. Lėkštę siūbuojant arba įpylus druskos, jos sunaikinamos.
Panagliutinacija, kai serumas sujungia visus raudonuosius kraujo kūnelius, įskaitant savo kraujo grupę. 5 minutę agliutinacijos požymiai išnyksta.
Taip pat yra vadinamoji šaltoji panagliutinacija, kai dėl žemos oro temperatūros (žemiau 15 ° C) patalpoje eritrocitai sulimpa.
Visais šiais atvejais atliekama arba pakartotinė reakcija, arba pagal standartinius eritrocitus.
Rh faktoriaus samprata
40-aisiais. praėjusio amžiaus (XX a.) žmonių kraujyje buvo rastas antigeninis faktorius, kuris randamas macacus rhesus beždžionių kraujyje ir vadinamas Rh faktoriumi. Jis buvo nustatytas 85% žmonių - Rh-teigiamas ir tik 15% žmonių jo neturi - Rh-neigiamas. Žmonių kraujyje nėra paruoštų antikūnų, tačiau jie gali atsirasti, jei Rh neigiamam recipientui perpilamas Rh teigiamas kraujas. Po kurio laiko jis sukurs Rh antikūnus, jie taip pat atsiras Rh neigiama moteris nėščia su Rh teigiamu vaisiumi. O jei dabar jie pila Rh teigiamas kraujas, tada bus sunki reakcija po perpylimo, iki mirties. Abejotinais atvejais perpilamas tik Rh neigiamas kraujas.
Kritiniais atvejais, kai nuo kraujo perpylimo priklauso žmogaus gyvybė ir jam niekada nebuvo perpiltas kraujas, o nėštumas pasibaigė gimdymu sveikas vaikas, galima perpilti kraują pacientui neatsižvelgiant į Rh priklausomybę, nes nėra natūralaus jautrumo Rh faktoriui.
Paciento priklausomybę nuo Rh galima nustatyti naudojant specialius serumus, kuriuose yra anti-Rh antikūnų. Serumas gaunamas iš kraujo Rh neigiami žmonės imunizuoti Rh faktoriumi. Serumas antireusas turi priklausyti tai pačiai kraujo grupei kaip ir pacientas.
Rh faktoriaus nustatymo metodas
Į sausą mėgintuvėlį be stabilizatoriaus paimkite 2-3 ml paciento kraujo. Iš mėgintuvėlio dugno eritrocitai surenkami į savo serumą (5-10 % suspensija). Ant Petri lėkštelės užlašinkite 2 lašus 2 serijų antireuso serumo ir 1 lašą recipiento kraujo, sumaišykite stikline lazdele. Petri lėkštelė dedama į vandens vonią (45 °C) 5-7 minutėms. Rezultatai matomi šviesoje baltame fone. Jei recipiento kraujas agliutinuojasi su abiem anti-Rh serumo serijomis, tada jis yra Rh teigiamas, o jei neagliutinuoja, tada jis yra Rh neigiamas.
Kai kuriais atvejais neįmanoma nustatyti recipiento priklausomybės Rh, tada atliekamas individualus donoro ir recipiento kraujo Rh suderinamumo tyrimas.
Ant Petri lėkštelės užlašinami 2 lašai paciento kraujo serumo ir nedidelis lašelis perpilto kraujo, jie sumaišomi ir dedami į vandens vonią (42-45 °C) 10 minučių. Jei įvyksta agliutinacija, donoro kraujas nesuderinamas su recipiento krauju ir jo negalima perpilti.
Nesuderinamo kraujo perpylimo pavojaus prevencija. Perpilto kraujo poveikis
Kad išvengtumėte nesuderinamo kraujo perpylimo pavojaus, turite žinoti:
donoro ir recipiento kraujo grupės;
biologinis suderinamumas;
paciento ir donoro priklausomybė nuo Rh;
Rh faktoriaus suderinamumo testas.
Perpilto kraujo veikimo mechanizmas yra sudėtingas ir įvairus ir nėra aiškiai apibrėžtas. Perpiltas kraujas visapusiškai išsprendžia 6 pagrindines problemas:
Pakeičia prarastą kraują;
Stimuliuoja organizmo apsaugą;
Turi hemostazinį poveikį – didina kraujo krešumą;
Pasižymi neutralizuojančiu poveikiu – detoksikuoja žmogaus organizmą;
Turi imunobiologinį poveikį;
Perpiltas kraujas turi maitinamąjį poveikį.
Pakaitinis veiksmas atkuria cirkuliuojančio kraujo tūrį, aktyvina medžiagų apykaitą, normalizuoja hemoglobino ir raudonųjų kraujo kūnelių skaičių, atkuria fiziologines kraujo funkcijas, palaiko rūgščių ir šarmų pusiausvyrą.
Perpilto kraujo stimuliuojantis poveikis pagrįstas susidariusių elementų ir kraujo plazmos, ypač baltymų komponentų, apsauginių jėgų aktyvavimu. Dirgindamas kraujagyslių dugno nervinius receptorius, o per juos ir visas nervų sistemos dalis, jis padidina retikuloendotelinio aparato, jungiamojo audinio ir visų organų bei sistemų regeneracines ir fiziologines savybes.
Hemostatinis poveikis pagrįstas padidėjusiu kraujo krešėjimu ir trombų susidarymu kraujagyslės sienelės pažeidimo vietoje. Pagerėja medžiagų apykaita, pagerėja organų funkcijos vidinė sekrecija ir neurohumoralinis reguliavimas organizme.
Neutralizuojantis perpilto kraujo poveikis sukelia toksinų koncentracijos paciento kraujyje praskiedimą, suaktyvėja detoksikacijos organų funkcija, padidėja toksinų išsiskyrimas per inkstus, suaktyvėja oksidaciniai procesai, suleidžiamo kraujo eritrocitai. (pagal S. I. Spasokukotsky), adsorbuoja toksinus.
Imunologinis veikimas grindžiamas žmogaus organizmo imuninių reakcijų stiprinimu, leukocitų fagocitinio aktyvumo didinimu, antikūnų dauginimosi stimuliavimu ir organizmo gynybos didinimu.
Maistinis kraujo perpylimo poveikis yra susijęs su aukštos kokybės baltymų, angliavandenių ir riebalų patekimu į organizmą lengvai virškinama forma.